副研究员
硕士生导师
性别：男
出生日期：1972-04-02
学历：博士研究生
学位：理学博士学位
入职时间：2007-11-20
电子邮箱：
在职信息：挂职
学科：药物分析学
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发表刊物：生物工程学报
刊物所在地：中国科学院微生物研究所;中国微生物学会
关键字：细胞穿膜肽，细胞珠蛋白，融合蛋白，纯化，氧化应激
摘要：旨在利用细胞穿膜肽TAT 的穿膜作用和细胞珠蛋白 (Cytoglobin, Cygb) 的抗衰老、抗纤维化的功能，将二者通过基因工程的手段融合在一起，以期获得能够穿透细胞屏障的Cygb。通过两次重叠PCR 技术获得了TAT-Cygb DNA，将其插入原核表达载体pET22b 质粒中，转化至大肠杆菌BL-21, 筛选出可表达TAT-Cygb 融合蛋白的大肠杆菌工程菌株。经乳糖诱导表达TAT-Cygb，CM 阳离子交换层析 (CM Sepharose Fast Flow Protocol) 获得纯度高达95%的TAT-Cygb 融合蛋白，分子量约23 kDa。生物活性实验显示，TAT-Cygb 过氧化物酶比活力达到(422.30±0.36) U/mg。TAT-Cygb 预处理的Hacat 细胞可免受H2O2氧化应激的损伤 (RGR=100%)，同时TAT-Cygb 可治疗已被H2O2 氧化损伤的细胞 (RGR=98%)，与Cygb 处理组相比具有显著差异 (RGR=79%)。该研究首次成功利用大肠杆菌表达系统表达了可穿透细胞膜的、有生物活性的TAT-Cygb 融合蛋白，为继续开展Cygb 在抗衰老、抗纤维化和抗癌领域的研究奠定了基础。
是否译文：否
发表时间：2013-12-08
第一作者：许瑞安,施伟杰(学),李招发,张如婧(学)
